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鸚鵡熱衣原體PCR檢測試劑盒的使用注意事項(xiàng)有哪些？

來源：上海炎熙生物科技有限公司 2025年09月25日 11:49

　　一、樣本處理與保存

　　‌1、樣本采集‌：需使用無菌采集管收集疑似感染樣本(如肺泡灌洗液、血液或組織)，避免污染。臨床樣本需在生物安全柜中操作，符合二級生物安全防護(hù)要求‌。

　　‌2、保存條件‌：短期保存(≤7天)可置于2-8℃；長期保存需-20℃或-80℃，避免反復(fù)凍融導(dǎo)致核酸降解‌。

　　二、試劑準(zhǔn)備與操作

　　‌1、試劑平衡‌：使用前將試劑盒從冰箱取出，室溫平衡20-30分鐘，避免冷凝水影響反應(yīng)體系‌。

　　‌2、分裝與防污染‌：

　　試劑分裝需在無核酸酶環(huán)境中進(jìn)行，使用高壓滅菌或?yàn)V膜過濾的耗材‌。

　　不同批次試劑禁止混用，避免交叉污染‌。

　　三、PCR實(shí)驗(yàn)流程

　　‌1、分區(qū)操作‌：嚴(yán)格遵循試劑儲(chǔ)存區(qū)→樣本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)的單向流程，避免氣溶膠污染‌。

　　‌2、加樣精度‌：使用校準(zhǔn)的微量加樣器(覆蓋0.2-1000μL)，確保模板和試劑添加量準(zhǔn)確‌。

　　‌3、擴(kuò)增程序‌：

　　設(shè)置陰性/陽性對照，監(jiān)控假陽性或假陰性結(jié)果‌。

　　若出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增，需優(yōu)化退火溫度或重新設(shè)計(jì)引物‌。

　　四、結(jié)果分析與質(zhì)控

　　‌1、Ct值判讀‌：根據(jù)試劑盒說明書設(shè)定閾值，Ct值≤35通常為陽性，需結(jié)合臨床樣本判斷‌。

　　‌2、污染處理‌：若陰性對照出現(xiàn)擴(kuò)增，需排查試劑、耗材或環(huán)境污染，重新配制反應(yīng)體系‌。

　　五、廢棄物處理

　　所有接觸樣本的耗材需高壓滅菌或化學(xué)滅活后丟棄，擴(kuò)增產(chǎn)物需在專用容器中處理‌。

　　六、其他注意事項(xiàng)

　　‌1、有效期檢查‌：試劑盒需在有效期內(nèi)使用，過期可能導(dǎo)致靈敏度下降‌。

　　‌2、儀器校準(zhǔn)‌：定期驗(yàn)證PCR儀溫度準(zhǔn)確性，避免擴(kuò)增效率異常‌。

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