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本生干貨分享:ELISA知識大解析
ELISA實(shí)驗(yàn)簡介
定義:ELISA知識大盤點(diǎn)生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各域中。
目的:為實(shí)驗(yàn)提供準(zhǔn)確可靠的定量分析實(shí)驗(yàn)依據(jù),為了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,在實(shí)驗(yàn)過程中必須堅(jiān)持質(zhì)量控制和全過程質(zhì)量控制。在收集標(biāo)本都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃。
ELISA試劑盒優(yōu)勢:
一、靈敏、特異的抗體;
二、定量準(zhǔn)確穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
ELISA實(shí)驗(yàn)試劑、儀器
ELISA樣本處理
標(biāo)本類型
常見的標(biāo)本一般包括:液體類標(biāo)本(包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等);培養(yǎng)細(xì)胞;組織標(biāo)本。這些標(biāo)本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。
血清:全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。
血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-2Na,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。
組織勻漿:用預(yù)冷的勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。
其它生物樣品:如固體生物代謝物,按組織樣本處理方法操作,懸浮物應(yīng)離心去除。
ELISA方法類型對比
三大類型實(shí)驗(yàn)步驟:
加樣移液方法
洗板方法
任何一個(gè)成功的ELISA知識大盤點(diǎn)檢測,正確的洗板方法是非常關(guān)鍵和重要的方面。連貫的洗板也是很有必要的。在稀釋濃縮洗滌液時(shí),請使用去離子水或者蒸餾水。
注:以上僅供參考,本產(chǎn)品僅供科研使用,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。
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