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【試劑描述】
ATTO 488 NHS 酯是一種基于羅丹明結(jié)構(gòu)的高性能親水性熒光標(biāo)記物,常用于蛋白質(zhì)、抗體、核酸等生物分子的高效標(biāo)記。它是 ATTO 488 熒光染料與 NHS (N-Hydroxysuccinimide) 酯基團(tuán)的共價(jià)結(jié)合物。
【試劑信息】
CAS 號(hào):863772-22-9
中文名稱:ATTO 488 NHS 酯;ATTO 488 琥珀酰亞胺酯
英文名稱:ATTO 488 NHS;ATTO 488 N-Hydroxysuccinimide Ester;
分子量:686.67
分子式:C29H26N4O12S2
光譜特性
激發(fā)波長(zhǎng) (λex):499 nm
發(fā)射波長(zhǎng) (λem):520 nm
吸收系數(shù) (ε):90,000 M-1 cm-1
性狀:液體
顏色:Orange to red
溶解性:溶于 DMSO、DMF;在 PBS 等水性緩沖液中表現(xiàn)出優(yōu)異的水溶性
結(jié)構(gòu)式:
純度:≥95%

儲(chǔ)存條件:-20℃以下冰凍、干燥保存,避免反復(fù)凍融
安全性:
操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備,避免接觸皮膚和眼睛。
如不慎接觸,請(qǐng)立即用大量清水沖洗,并尋求醫(yī)療幫助。
【化學(xué)特性】
反應(yīng)活性:
NHS酯基團(tuán)在pH 7-9條件下與胺基反應(yīng)效率高,反應(yīng)時(shí)間短(通常數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)),標(biāo)記產(chǎn)率高。
反應(yīng)特異性強(qiáng),可避免非目標(biāo)分子的非特異性結(jié)合。
溶解性與穩(wěn)定性:
溶解性:溶于DMSO、DMF等有機(jī)溶劑,水溶性優(yōu)良,可直接用于水相標(biāo)記反應(yīng)。
儲(chǔ)存穩(wěn)定性:需在-20℃避光干燥保存,防止熒光淬滅或化學(xué)降解。
生物相容性:
標(biāo)記后對(duì)生物分子功能影響小,適用于蛋白質(zhì)活性檢測(cè)、細(xì)胞內(nèi)定位等研究。
【ATTO 488 NHS酯可標(biāo)記的生物分子主要包括以下三類,其標(biāo)記機(jī)制基于NHS酯與胺基的特異性反應(yīng)】
蛋白質(zhì)
ATTO 488 NHS酯通過與蛋白質(zhì)中的賴氨酸殘基側(cè)鏈的ε-氨基或N端α-氨基發(fā)生酰胺化反應(yīng),形成穩(wěn)定共價(jià)鍵。該反應(yīng)在中性至弱堿性環(huán)境(pH 7-9)中效率高,且對(duì)蛋白質(zhì)天然構(gòu)象影響小,適用于抗體、酶、受體蛋白等標(biāo)記,為免疫熒光、Western blot及蛋白質(zhì)互作研究提供高靈敏度檢測(cè)工具。
多肽
多肽分子中若含有游離胺基(如N端氨基或側(cè)鏈氨基),均可與ATTO 488 NHS酯反應(yīng)。標(biāo)記后的多肽可用于追蹤其細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)分布、研究信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制,或作為熒光探針檢測(cè)特定生物分子。
核酸(氨基修飾的寡核苷酸)
通過化學(xué)修飾在寡核苷酸5'端或3'端引入氨基基團(tuán)后,ATTO 488 NHS酯可實(shí)現(xiàn)核酸熒光標(biāo)記。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于熒光原位雜交(FISH)、基因測(cè)序及單分子檢測(cè),助力基因定位與染色體分析。
【相關(guān)試劑】
Biotin-11-UTP
Pyrene maleimide
BDP 558/568 azide
Biotin-PEG4-tetrazine
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Cyanine5 carboxylic acid
sulfo-Cyanine7 NHS ester
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該試劑僅用于科研實(shí)驗(yàn),不可用于人體
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