【試劑描述】

Atto 425作為一種藍(lán)光激發(fā)的熒光染料，配備有NHS（N-羥基琥珀酰亞胺）活性酯基團(tuán)，能夠與胺基（像蛋白質(zhì)、抗體以及肽鏈里的賴氨酸殘基所含的胺基）產(chǎn)生共價結(jié)合反應(yīng)。Atto 425 NHS Ester的分子結(jié)構(gòu)里包含NHS活性酯基團(tuán)，該基團(tuán)可在溫和條件下與初級胺特異性反應(yīng)，進(jìn)而生成穩(wěn)定的酰胺鍵。這種借助化學(xué)手段進(jìn)行修飾的方法，在標(biāo)記蛋白質(zhì)、多肽以及其他含氨基的生物分子方面應(yīng)用廣泛。

【試劑信息】

中文名稱：ATTO 425琥珀酰亞胺酯、ATTO 425-N-羥基琥珀酰亞胺酯

英文名稱：ATTO 425 NHS ester；ATTO 425 SE；ATTO 425-NHS；

CAS號：892156-28-4

分子式：C??H??N?O?

分子量：498.52

純度：≥95%

外觀：藍(lán)色固體/粉末

溶解性：可溶于DMSO、DMF、乙醇及水溶液（需避光）

結(jié)構(gòu)式：

安全性：

操作時需佩戴防護(hù)裝備，避免接觸皮膚和眼睛。

如不慎接觸，請立即用大量清水沖洗，并尋求醫(yī)療幫助。

【應(yīng)用范圍】

蛋白質(zhì)與抗體標(biāo)記：借助NHS酯和蛋白質(zhì)賴氨酸殘基上的胺基發(fā)生共價結(jié)合反應(yīng)，實現(xiàn)熒光標(biāo)記抗體的制備。

細(xì)胞成像：對細(xì)胞表面蛋白或細(xì)胞內(nèi)蛋白進(jìn)行標(biāo)記，以便利用熒光顯微鏡開展觀察工作。

流式細(xì)胞術(shù)：充當(dāng)熒光探針，用于分析細(xì)胞群體特征。

免疫熒光分析：提升檢測的靈敏度以及信號的特異性。

分子相互作用研究：作為示蹤劑，用于開展結(jié)合動力學(xué)和空間分布方面的研究。

【使用注意事項】

此試劑對水分較為敏感，保存時需避光、保持干燥，并置于低溫環(huán)境中冷藏。標(biāo)記反應(yīng)要在堿性緩沖液（pH約7.5 - 8.5）里進(jìn)行，以此確保胺基的活性。標(biāo)記結(jié)束后，要及時去除未參與反應(yīng)的游離染料，降低背景信號干擾。進(jìn)行活細(xì)胞標(biāo)記時，要留意細(xì)胞毒性問題，并優(yōu)化染料濃度。

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該試劑僅用于科研實驗，不可用于人體