Orbitrap高分辨質(zhì)譜憑借其高分辨率、高質(zhì)量精度和高靈敏度，在蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
Orbitrap高分辨質(zhì)譜的優(yōu)點(diǎn)：
1.高分辨率：能達(dá)到高達(dá)120,000的分辨率，可區(qū)分質(zhì)量非常接近的離子，能更準(zhǔn)確地鑒定化合物的組成和結(jié)構(gòu)，為復(fù)雜樣品的分析提供了有力支持。
2.高準(zhǔn)確度：具備質(zhì)量測(cè)量精度，如EASY-IC內(nèi)標(biāo)校正技術(shù)可實(shí)現(xiàn)連續(xù)5天質(zhì)量偏移小于1ppm，這使得對(duì)化合物的定性分析更加可靠，有利于未知物的準(zhǔn)確鑒定。
3.高靈敏度：電場(chǎng)軌道阱的設(shè)計(jì)能有效捕獲和積累離子，增加軌道上離子的數(shù)量，從而提高信號(hào)強(qiáng)度。還可通過(guò)提高軌道頻率和增加離子留存時(shí)間進(jìn)一步提升靈敏度，能檢測(cè)到低濃度的樣品成分。
4.快速掃描速度：具有22H的掃描速度以及1.4H的極性切換掃描速度，能夠在較短時(shí)間內(nèi)獲取大量數(shù)據(jù)，提高了分析效率，適用于高通量分析和快速變化樣品的檢測(cè)。
5.穩(wěn)定性強(qiáng)：嶄新的離子路徑設(shè)計(jì)和高場(chǎng)Orbitrap的結(jié)合，保證了儀器性能的持續(xù)穩(wěn)定，日復(fù)一日都能提供可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，減少了因儀器波動(dòng)帶來(lái)的誤差。
6.節(jié)省成本：儀器的穩(wěn)定性不僅體現(xiàn)在數(shù)據(jù)質(zhì)量上，還體現(xiàn)在節(jié)省維護(hù)成本方面。其質(zhì)量穩(wěn)定性減少了校準(zhǔn)和維護(hù)的頻率，降低了人力和物力投入。
7.操作簡(jiǎn)便：優(yōu)化的軟件提高了易用性，讓用戶無(wú)需花費(fèi)過(guò)多精力在儀器操作上，而是可以專注于研究?jī)?nèi)容，提高了工作效率。
8.體積小巧：體積約為QE系列的一半，為實(shí)驗(yàn)室節(jié)省了寶貴的空間，使實(shí)驗(yàn)室的空間布局更加靈活。
Orbitrap高分辨質(zhì)譜的測(cè)定步驟：
1.樣本前處理
-樣本保存：組織樣本需快速冷凍并儲(chǔ)存于-80℃；細(xì)胞樣本應(yīng)立即裂解以避免蛋白降解。
-蛋白提取與酶解：根據(jù)樣本類型選擇裂解液(如RIPA或8M尿素)，經(jīng)還原烷基化后，用Trypsin按1:50比例過(guò)夜酶解，并通過(guò)C18柱純化肽段以提高質(zhì)譜兼容性。
2.色譜分離
-采用高效液相色譜對(duì)酶解后的肽段進(jìn)行分離，減少基質(zhì)干擾。
3.質(zhì)譜參數(shù)設(shè)置
-分辨率：MS2階段建議設(shè)置為30,000-60,000以平衡靈敏度與分辨率。
-掃描模式：DIA模式通過(guò)預(yù)設(shè)m/窗口實(shí)現(xiàn)全肽段掃描，而PRM則靶向選擇目標(biāo)肽段的前體離子及其碎片離子，適合高精度定量分析。
4.數(shù)據(jù)采集與分析
-原始數(shù)據(jù)需經(jīng)過(guò)生物信息學(xué)分析，包括數(shù)據(jù)庫(kù)檢索、峰匹配及定量校正。引入穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)可提升跨批次數(shù)據(jù)的一致性。
手機(jī)版
制藥網(wǎng)手機(jī)版
制藥網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：zyzhan
預(yù)告 
預(yù)告 
預(yù)告 
